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ブロスの準備 1. ブロスを取り出し、検体番号をラベルに記入します。 2. ブロスにガラスビーズを入れる ブロスに直径2mm位のガラスビーズを0.5〜1g程度いれます。。 菌液の調製 1. 釣菌 無菌操作法を用いて、滅菌綿棒(ポリエステル製は用いない)の先端、またはディスポーザブル白金耳で、適切な培地の1つから、純培養したコロニーを多く釣菌します。 2. ブロスにコロニーを懸濁 BBLCRYSTAL ブロスにコロニーを懸濁します。 3. ボルテックスミキサー等で撹拌 再びブロスにキャップをして、約10〜15秒間ボルテックスミキサーで攪拌します。 4. ソニケート 45khzの条件で、5分ソニケートします。 5. 「ボルテックスミキサー等で撹拌〜ソニケート」を繰り返す 約10〜15秒間ボルテックスミキサーで攪拌します。 再度攪拌し45khzの条件で、5分ソニケートします。 6. ブロスを5分間静置します。 7. 上澄み液を使ってマクファーランド濃度の調製をします。 |