滅菌操作の実行:シースタンクの洗浄
< シースタンクの除菌操作>
滅菌PBSなどのFACSFlow以外の溶液を用いる場合には、シースタンクを70% エタノールにて洗浄した後に使用します。タンク除菌後、滅菌蒸留水で数回洗い滅菌PBSを入れます。
<滅菌PBSを用いる場合に必要なもの>
- 70% エタノール 約3L:シースタンクの洗浄に使用
- 滅菌蒸留水 約3L:シースタンクの洗浄に使用
- 滅菌PBS 約10L:アジ化ナトリウムを含まない溶液を調製またはFACSFlow
※ アジ化ナトリウムは、ノズルなど金属パーツを劣化させる可能性があります。
- Streamをオフにし、ベントバルブよりシースタンクの圧を抜きます。
- シースライン、エアコネクタ、センサープラグをはずし、シースタンクを空にします。タンク内外の汚れ等を十分に洗浄します。
- 洗浄後、70% エタノールを3L入れて蓋を閉め、タンク内にエタノールが行き渡るように攪拌します。
- コネクタ付きシリンジを、シースコネクタ上部に取り付け、シリンジを引きます。(タンク内、シースラインもエタノールで満たされます)
- この状態で、30分間静置し、タンク内部を滅菌します。
- 30分後、タンク蓋を開け、エタノールを捨てます。
- 内部を滅菌蒸留水を用いて、2度共洗いを行い、タンク内部よりエタノールを流しだします。
- タンクに、FACSFlowもしくは滅菌PBSを必要量(3L以上)入れ、蓋をします。