ソーティングの設定に関するトラブルシューティング (2)
症状 考えられる現象 解決方法
偏向板(Deflection plate)に電圧を加え、Test SortをONにするとサイドストリームウィンドウに横一線が入ります。 センターストリームがアスピレーターに当たっている可能性があります。 センターストリームの位置を確認してください。
左右のアスピレーターの吸引が下がっている可能性があります。 BD FACSRinseで左・中・右のアスピレーターをよく洗浄してください。
Drop Delay調整時、左側ソートゲートの%が上がりません。 Accudropビーズの調整を蒸留水や脱イオン水で行っている可能性があります。 蒸留水や脱イオン水で調製すると蛍光が下がります。FACSFlowもしくはPBS(カルシウム・マグネシウムFree)で調製してください。
Threshold Rate(Event Rate)が不適切な可能性があります。 Flow Rateが1.0 ～5.0 の範囲で、それぞれのノズルにあったThreshold Rate (Event Rate)になるように調整してください。
レフトストリームがOptical Filterの枠に入っていない可能性があります。 Optical FilterがONの状態でTest Sortを行いサイドストリームのスライダーの位置を調整してください。左の枠にLeftストリームが入るように調整してください。
Drop Delayの値が大きくずれている可能性があります。 一度初期値に戻してから実施してください。(70 umモード = 47、85 umモード = 30、100 umモード = 27、130 umモード = 16)
レフトストリームにDiodeレーザーが十分に当たっていない可能性があります。 Micrometer Dialを用いて調整しレフトおよびセンターストリームのスポットが最も大きく、明るくなるようにしてください。
振動数(Freq)が不適切な可能性があります。 振動数(Freq)の値を確認してください。
＜参考＞ 70 umモード : Freq 87(±3)、85 umモード : Freq 47 (±3) 、100 umモード : Freq 30 (±3) 、130 umモード : Freq 12 (±3)
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